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液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。液相色谱柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降。需要定期进行*清洗和再生,不同的色谱柱清洗方法各不相同比如:1反相柱分别用甲醇:水=90:10,纯甲醇(HPLC级),异丙醇(HPLC级),二氯...
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1色谱柱的维护。我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象,造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复,首先,使用含盐缓冲液后(如离子对试剂)应用溶解性强的溶剂(如水)进行冲洗。其次,先断开检测器,然后用对来自样品...
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液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。在我们做实验的时候用液相色谱仪分析过程的时候影响溶液迁移的因素比...
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高压输液泵是液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪,流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。高压液相色谱仪对高压输液泵的基本要求如下:1流量准确可调对一般的分析工作而言,流动相的流速在0.5~2mL/min,输液泵的zui大流量一般为5~10mL/min。输液泵的流量控制精度通常要求小于±0.5%。输液泵必须能地调节流动相流量,这样可以通过电子线路调节电极转...
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制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。1.快速色谱柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混合物,由于快速色谱具有操作简便、经济等优点,常常是实验室的。但快速色谱不同于一般的层析分离,这种分离没有压力,而快速分离通常使用瓶装氮气加压,使流动相具有一定的流速,从而缩短了分离时间。快速色谱使用的...
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液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱及液-固色谱。现代液相色谱仪由高压泵、色谱柱、检测器、温度控制系统、进样系统、信号记录系统和馏分收集器等部分组成。液相色谱仪的工作原理是储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,液相色谱仪通过检测器时,样品浓度被...
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液相色谱法测定牡丹皮中丹皮酚的含量牡丹皮为毛茛科植物牡丹的干燥根皮,味苦、性微寒,具有清热凉血,活血散瘀的功能。丹皮酚是丹皮中重要的有效成分,具有镇静、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血压等多种功效。目前采用液相色谱测定丹皮酚的含量是丹皮及其制剂质量的控制指标。本文采用天津兰博的液相色谱系统,建立了检测丹皮中丹皮酚的含量的方法,结果显示方法简便,结果可靠。1测试条件1.1仪器分析型液相色谱仪(HPLC),由AS1000自动进样器,LabllianceSeries高压泵、DAD检测...
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一般情况下,氘灯发光孔处发黑,就应该考虑氘灯的使用寿命是否到期了。氘灯正常使用时的能量衰减是一个很缓慢的过程。当氘灯使用寿命快到时,它发出的光强衰减的会很快一直到它不能点亮为止。如果一直出现点灯失败,那就表明您可以考虑换灯了。氘灯的能量减少量主要取决于以下3个因素(1)此氘灯的内部金属部件以及涂料的蒸发。(2)此氘灯的灯丝涂料的材料与石英套发生反应(主要是阻碍穿透)。(3)日晒光照会导致石英套吸收200—250nm波长的光。氘灯使用寿命缩短甚至于早期失效的主要原因(1)氘灯的...