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生化方面①在细胞核中有种类繁多的甙及核甙酸,可用不同的检测器或酶转移检测器或利用酶反应进行定性测定。用离子交换柱和缓冲游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的缓冲水溶液的梯度淋洗法均能得到满意的结果。②分析核酸近年来有关分析核酸的研究很多,主要是分离RNA、DNA及碎片。现在使用硅烷化的硅藻土或长碳链季胺盐涂渍=在上面制成系列填充柱。已能分离t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有没的缓冲液淋洗,还可利用此技术做RNA碎片的序列分离制备工具,对生物研究起了重要的作用。③氨基酸、肽、蛋白...
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液相色谱是目前应用zui多的色谱分析方法,液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛,几乎遍及定量定性分析的各个领域。现代液相色谱仪色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的...
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液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。液相色谱仪广泛应用于各种科研、生产领域中,在日常研究生产使用中我...
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液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。液相色谱法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。HPLC有以下特点:高压——压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降压为75Kg/cm2以上。高速——流速为0.1~10.0ml/min。——可达5000塔板每米。在一根...
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液相色谱仪是属于易学难用的仪器,特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触zui多的是流动相,也就是流动相,是造成液相色谱各种问题的zui主要源头。液相色谱仪zui常见的故障一是堵,二是漏。下面就这两点分别展开讨论。(注:流动相以甲醇为例,色谱柱以C18为例)“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,zui主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。“堵”的原因之一:配制流动相时细菌污染。首先我们要认识到,一般的国产甲醇...
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色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是*条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。1、样品的前处理a、使用流动相溶解样品。b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。2、流动相的配制液相色谱是样品组分在柱填料与流...
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一、分离分析药物的组分含量:由于药剂常含有组分,色谱方法是既能分离又能定量的方法。如脂溶性维生素片,含有铬维生素,有C18柱及含1%碳酸铵的甲醇流动相。一次即可将各维生素B6、D1、A、E同时分离并定出含量。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。二、药物生产中进行中间控制:生产抗菌素时,首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如:青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆霉素等的发酵产物,均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法,分析主体...
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1.色谱图和峰参数色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile)。基线(baseline)--经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。噪音(noise)--基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。漂移(drift)--基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所...