进口液相色谱仪一般情况下的使用技巧

　　进口液相色谱仪对于*种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)，再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳，则考虑第二种情况。

　　对于第二种情况，拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料)，装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30分钟以上。

　　对进口液相色谱仪的要求

　　1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。

　　2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。

　　3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

　　4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。

　　5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如，甲醇等)，因为，纯水易长霉。

　　6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

　　7.C18柱不能进蛋白样品，血样、生物样品。

　　8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗，清洗方法：

　　①以异丙醇作溶剂冲洗；

　　②放在异丙醇中间用超声波清洗；

　　③用10％稀硝酸清洗；

　　9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

　　10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。

　　11.进口液相色谱仪要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。

　　12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。